在浮游植物檢測(cè)中,測(cè)出的葉綠素a的含量是表征浮游植物生物量的重要指標(biāo)之一。經(jīng)過(guò)測(cè)定浮游植物葉綠素,可把握水體初級(jí)生產(chǎn)力情況,反映水體富營(yíng)化程度。一般對(duì)淡水中葉綠素a的測(cè)定辦法是選用《水和廢水監(jiān)測(cè)剖析辦法(第四版)》,即下面所用的標(biāo)準(zhǔn)辦法。該辦法實(shí)驗(yàn)提取進(jìn)程操作略顯繁瑣,樣品在剖析進(jìn)程中多次轉(zhuǎn)移,易造成樣品的缺失,影響浮游植物判定成果。在不影響丙酮萃取分光光度法原理的前提下,使用丙酮加熱以提高萃取才能,并對(duì)若干個(gè)湖泊、湖庫(kù)、河流水進(jìn)行了比照實(shí)驗(yàn)。
在改善的辦法中,將過(guò)程2的樣品提取,從“取出干燥后的濾膜放入研缽,參加少數(shù)碳酸鎂粉末和2~3mL90%丙酮,充分研磨提取葉綠素a。用離心機(jī)4000r/min離心20min。將上清液轉(zhuǎn)入10mL比色管,用90%丙酮定容為10mL,搖勻?!备某伞皩⒏稍锖蟮臑V膜放入10mL具塞比色管中,參加少數(shù)的碳酸鎂粉末,再參加90%丙酮10mL,旋緊管塞,于50℃恒溫水浴鍋中萃取5min。充分搖勻后,放入4℃冰箱在黑私自浸漬提取5h。”
經(jīng)過(guò)兩個(gè)辦法得出的結(jié)論可看出,標(biāo)準(zhǔn)法操作過(guò)程略顯繁瑣,在樣品的研磨進(jìn)程中,原本含量就低的樣品極易損失,不易搜集。丙酮易揮發(fā)的特性,又使得研磨不能持久太久,造成標(biāo)準(zhǔn)法的測(cè)定成果偏低。改善法使用丙酮加熱提升了丙酮的萃取才能,延長(zhǎng)浸漬時(shí)刻,促進(jìn)藻類細(xì)胞決裂,使更多的葉綠素a從細(xì)胞中釋放出來(lái)。在整個(gè)進(jìn)程中,提取物一直堅(jiān)持在密閉的比色管中,堅(jiān)持了定容的體積,保證了葉綠素a濃度的可靠性。實(shí)驗(yàn)證明,選用丙酮加熱、延長(zhǎng)提取時(shí)刻的辦法可以提高對(duì)葉綠素a的提取,簡(jiǎn)便易操作的特點(diǎn)更適用于大批樣品的數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)。